Puskuriliuokset ovat vesipohjaisia nesteitä, jotka sisältävät sekä heikon hapon että sen konjugoidun emäksen. Kemiallisista ominaisuuksista johtuen puskuriliuokset voivat pitää pH: n (happamuus) lähes vakiona samalla tasolla, kun kemiallisia muutoksia tapahtuu. Puskurijärjestelmiä esiintyy luonnossa, mutta ne ovat erittäin hyödyllisiä myös kemiassa.
Käyttö puskuriliuoksiin
Orgaanisissa järjestelmissä luonnolliset puskuriliuokset pitävät pH: n tasaisella tasolla, jolloin biokemialliset reaktiot voivat tapahtua vahingoittamatta organismia. Kun biologit tutkivat biologisia prosesseja, heidän on ylläpidettävä samaa tasaista pH: ta; he käyttivät valmistettuja puskuriliuoksia. Puskuriliuokset kuvattiin ensimmäisen kerran vuonna 1966; monia samoja puskureita käytetään nykyään.
Jotta biologiset puskurit olisivat hyödyllisiä, niiden on täytettävä useita kriteerejä. Erityisesti niiden tulisi olla vesiliukoisia, mutta ei liukoisia orgaanisiin liuottimiin. Niiden ei pitäisi voida kulkea solukalvojen läpi. Lisäksi niiden on oltava myrkyttömiä, inerttejä ja vakaita kaikissa kokeissa, joita varten niitä käytetään.
Puskuriliuoksia esiintyy luonnollisesti veriplasmassa, minkä vuoksi veri ylläpitää tasaista pH: ta välillä 7,35 - 7,45. Puskuriliuoksia käytetään myös:
- käymisprosessit
- kuolevat kankaat
- kemiallinen analyysi
- pH-metrien kalibrointi
- DNA: n uutto
Mikä on Tris-puskuriliuos?
Tris on lyhyt tris (hydroksimetyyli) aminometaanille, kemialliselle yhdisteelle, jota käytetään usein suolaliuoksessa, koska se on isotoninen ja myrkytön. Koska Tris-pKa: n pKa on 8,1 ja pH-arvo on välillä 7 - 9, Tris-puskuriliuoksia käytetään myös yleisesti kemiallisissa analyyseissä ja menettelyissä, mukaan lukien DNA: n uuttaminen. On tärkeätä tietää, että tris-puskuriliuoksen pH muuttuu liuoksen lämpötilan kanssa.
Kuinka valmistaa Tris-puskuria
Kaupallisesti saatavissa oleva tris-puskuriliuos on helppo löytää, mutta on mahdollista tehdä se itse sopivilla laitteilla.
tarvikkeet:
Laske kunkin tarvitsemasi osan määrä haluamasi liuoksen moolipitoisuuden ja tarvittavan puskurimäärän perusteella.
- tris (hydroksimetyyli) aminometaani
- tislattu deionisoitu vesi
- HCl:
menettely:
- Aloita määrittämällä mikä pitoisuus (molaarisuus) ja määrä Tris-puskuria, jonka haluat tehdä. Esimerkiksi suolaliuokseen käytetty Tris-puskuriliuos vaihtelee välillä 10 - 100 mM. Kun olet päättänyt tekemästäsi, laske tarvittava Tris-moolimäärä kertomalla puskurin moolipitoisuus valmistettavan puskurin tilavuudella. (Trisin moolit = mol / L x L)
- Seuraavaksi määritetään kuinka monta grammaa Trisä tämä on kertomalla moolien lukumäärä Tris-molekyylipainolla (121,14 g / mol). grammaa Tris = (moolia) x (121,14 g / mol)
- Liuota Tris tislattuun ionittomaan veteen, 1/3 - 1/2 halutusta lopullisesta tilavuudesta.
- Sekoita HCl: ssä (esim. 1 M HCI) kunnes pH-mittari antaa sinulle halutun pH: n Tris-puskuriliuoksellesi.
- Laimenna puskuri vedellä halutun lopullisen liuottimäärän saavuttamiseksi.
Kun liuos on valmistettu, sitä voidaan säilyttää kuukausia steriilissä paikassa huoneenlämpötilassa. Tris-puskuriliuoksen pitkä säilyvyys on mahdollista, koska liuos ei sisällä proteiineja.