Natriumsitraattipuskuria käytetään usein RNA: n eristämiseen, koska se minimoi RNA-juosteiden emäshydrolyysin, mikä tekee siitä korvaamattoman mRNA: n puhdistuksen aikana genominen tutkimusta ja transkription tutkimista. Sitraattipohjaiset puskurit auttavat myös antigeenien havaitsemista kiinteissä kudosvalmisteissa, koska ne rikkovat antigeenien ja kiinnitysväliaineiden välillä muodostetut ristisidokset.
Seuraavilla helpoilla vaiheilla voidaan luoda natriumsitraattipuskuri, jonka pH on 6 (hapan) alle 10 minuutissa.
Materiaalit natriumsitraattipuskurille
Natriumsitraattipuskurin valmistamiseksi vaaditaan muutama materiaali. Sitruunahapon kanssa tarvitaan vain 1 M natriumhydroksidia, tislattua vettä ja kalibroitu pH-koetin. Natriumsitraatti on valinnainen.
Puskurin valmistamiseksi tarvitaan myös 1 litran mittalasi, 1 litran mittapullo ja kolme 1 litran väliainepulloa. Lopuksi tarvitset magneettisen sekoituspalkin ja magneettisen sekoittimen. Kaikki nämä materiaalit löytyvät koulussa, työmaan laboratoriot tai ostaa verkosta tai erikoiskaupoista.
Kaksi vaihtoehtoa puskurin valmistamiseksi
Natriumsitraattipuskurien valmistamiseksi on kaksi tapaa käytettävissä olevista materiaaleista riippuen.
- Jos sinulla on sekä sitruunahappoa että konjugaattiemästä, luo kumpikin kantaliuos sekoittamalla 21 grammaa sitruunahappoa 1 litrassa tislattua vettä ja 29,4 grammaa natriumsitraattia 1 litrassa tislattua vettä vettä.
- Jos sinulla on vain sitruunahappoa kädessä, sekoita 2,1 grammaa vain alle litraan tislattua vettä.
Sitruunahapon ja natriumsitraattiliuosten sekoittaminen
Sekoitetaan 82 millilitraa sitruunahappoliuosta 18 millilitran kanssa natriumsitraattiliuosta. Lisää tähän tislattua vettä tarpeeksi, jotta seoksen tilavuus on hieman alle 1 litra.
PH: n säätäminen
Sekoittamalla liuosta varovasti magneettisekoittimella, käytä 1 M natriumhydroksidia säätääksesi seoksen pH arvoon 6,0. Lisää sitten tislattua vettä mittapullolla lisäämällä lopullinen lopullinen kokonaistilavuus tilavuuteen 1 litra.