Lyofilisointi, joka tunnetaan myös nimellä kylmäkuivaus, on menetelmä, jota käytetään biologisen materiaalin säilyttämiseen poistamalla näytteen vesi, johon sisältyy näytteen ensin jäädyttäminen ja sen jälkeen kuivaaminen tyhjössä erittäin alhaisella paineella lämpötiloissa. Lyofilisoituja näytteitä voidaan varastoida paljon kauemmin kuin käsittelemättömiä näytteitä.
Miksi lyofilisointia käytetään?
Lyofilisointi tai bakteeriviljelmien kylmäkuivaus, stabiloi viljelmät pitkäaikaista varastointia varten minimoimalla vahingot, jotka näytteen tiukka kuivaaminen voi aiheuttaa. Monet mikro-organismit selviytyvät hyvin lyofilisoituna ja ne voidaan helposti hydratoida ja kasvattaa viljelyväliaineissa pitkän ajanjakson varastoinnin jälkeen.
Lyofilisointia käytetään myös biotekniikka ja biolääketieteen teollisuus rokotteiden, verinäytteiden, puhdistetut proteiinitja muut biologiset materiaalit.
Tätä lyhyttä laboratorioproseduuria voidaan käyttää minkä tahansa kaupallisesti saatavan pakastekuivaimen kanssa viljelmäkokoelmasi säilyttämiseksi.
Prosessi
Lyofilisointiprosessi on itse asiassa fyysisen ilmiön, nimeltään sublimaatio, soveltaminen: aineen siirtyminen kiinteästä kaasumaiseen tilaan kulkematta ensin nesteen läpi vaihe. Kylmäkuivauksen aikana jäädytetyn näytteen vesi poistetaan vesihöyrynä ilman, että näytettä sulattaisiin ensin.
Yleiset virheet
Yksi yleisimmistä lyofilisoinnin virheistä ei ole näytteen sulamispisteen tunteminen, mikä vaikeuttaa oikean lyofilisoijan valitsemista. Näytteesi voivat sulautua prosessin aikana. Toinen yleinen virhe on, että kylmempi ajattelu on parempi, kun se kylmäkuivataan hyllytyyppisessä pakastekuivaimessa. Ensisijaisen kuivauksen aikana sinun tulisi asettaa hyllyn lämpötila juuri näytteen eutektisen lämpötilan alapuolelle. Lämpöä pitäisi olla juuri tarpeeksi näytteen molekyylien liikkumisen rohkaisemiseksi - mutta kuitenkin sulamisen estämiseksi.
Kolmas virhe on väärän laitteen käyttäminen näytteillesi. Koska kylmäkuivaajia käytetään ryhmäympäristössä, sinun tulee tietää seuraavat asiat ennen ostoa:
- Kuinka paljon kosteutta lyofilisoituu
- Mikä on näyte (ja eutektinen lämpötila)
- Kuinka käyttää pakastekuivainta oikein
Jos yksikköä ei käytetä oikein, se voi pilata kaikki näytteet. Mikä vie meidät toiseen yleiseen virheeseen: tyhjiöpumpun ylläpitämättä jättäminen. Pumpun on oltava hyvässä kunnossa, jotta lyofilisointi toimisi. Pumpun käyttö pidentää pumpun käyttöikää kaasun liitäntälaitteen ollessa auki 30 minuuttia ennen pakastekuivatusprosessia ja sen jälkeen. Kaasulaskurin avaaminen puhdistaa epäpuhtaudet pumpusta sisäisten komponenttien vaurioiden estämiseksi. Tarkista, että pumpun öljyssä on usein värimuutoksia ja hiukkasia, ja vaihda öljy tarvittaessa. Säännölliset öljynvaihto pitää pumpun vetämällä optimaalisessa tyhjiössä pakastekuivausprosessin aikana.
Viimeiseksi, väärien kylmäkuivatustarvikkeiden käyttö lyofilisointiprosessissasi voi myös olla suuri virhe. Tarvitsetko tulpanäytteen tyhjiösi alla? Sitten vaaditaan pysäytyskammio. Jäädytkö kuivaamassa pulloissa? Varmista sitten, että sinulla on kuivauskammio, jossa on portit.
Välttämällä yllä olevat virheet voit tarjota parempaa hoitoa pakastekuivaimellesi ja pumpullesi, ja saada parempia näytteitä, kun pakastekuivaus tehdään.
Viitteet
Labconco News. "Lyofilisointiprosessissa tehdyt 5 parasta virhettä."